在酶聯(lián)免疫實驗操作的過程中常常會存在復(fù)測問題，即咱們常常說的花板問題，此種問題影響到檢驗檢測結(jié)論的準確判定，對工作任務(wù)帶來相應(yīng)的不良影響，如若產(chǎn)生花板現(xiàn)象，實驗操作結(jié)論務(wù)必選擇放棄，中海生物操作員需再次開展檢驗檢測，不但消耗原材料和時長，同時還可能會存在樣本量缺失/交叉式被污染/匯報時間延遲等多方面問題。

㈠標本問題

要嚴格規(guī)范正確處理樣本，預(yù)防血漿層大規(guī)模溶血和異物，使用一次性采樣槍頭，避免交叉污染。血清和血漿均可用于檢測，但血清的分離應(yīng)在血液完全凝固后進行離心操作。

㈡試劑問題

保存并正確使用有效試劑。與金屬容器接觸的過期試劑和底物的使用，以及底物混合后較長的儲存時間都影響實驗結(jié)果的準確性。中海選擇試劑時，應(yīng)選擇靈敏度高\特異性好\穩(wěn)定性好\批間差異小的試劑。不同制造商的試劑不應(yīng)混合，包括底物和洗滌液。測試前，獸用診斷試劑應(yīng)在室溫下放置半小時進行平衡，現(xiàn)在應(yīng)準備好清洗液。同時中海生物觀察濃縮清洗液中是否有結(jié)晶。如果有結(jié)晶，放入三十七度的水浴中融化后再使用。

㈢操作問題

嚴格按照相關(guān)實驗室的標準操作規(guī)程進行試驗。中海生物技術(shù)人員添加樣品時，盡可能垂直添加樣品，并將其添加到涂層孔的底部。注意：不要過度用力破壞底部涂層材料，也不要將其添加到孔的上部和外部。

㈣溫浴問題

當水浴箱用作溫水浴裝置時，應(yīng)注意水深對結(jié)果的影響。當水浴箱中水的實測溫度為三十七度時，水面溫度可能只有三十四度，空氣溫度更低，甚至只有二十多度。因此當水浴箱內(nèi)水位過低時，酶標微孔板不會浸入水中，反應(yīng)溫度不會達到三十七度，會相應(yīng)影響酶促反應(yīng)。為了防止邊緣效應(yīng)，酶聯(lián)免疫吸附試驗板應(yīng)盡可能浸入水中，從而保證加熱均勻。水浴中，海應(yīng)密封酶聯(lián)免疫吸附試驗板，防止水滴滴入包被孔或陽性樣品蒸發(fā)。嚴格控制暖浴時間，不要為了早出效果而隨意縮短暖浴時間。

㈤洗板機問題

廢液瓶裝滿后要及時倒空，防止廢液回流污染管道，導(dǎo)致沖洗不徹底，容易出現(xiàn)花板。洗完板后用蒸餾水徹底清洗管道，防止廢液殘留在管道內(nèi)。同時應(yīng)根據(jù)中海儀器維護程序定期維護洗衣機。

㈥酶標儀問題

酶標儀應(yīng)放在遮陽避光的地方，比色前應(yīng)打開預(yù)熱十五至三十分鐘，這樣測定結(jié)果會更穩(wěn)定。為防止顯色加深或減弱，顯色時間結(jié)束后應(yīng)立即滴止液，避免產(chǎn)生氣泡，十分鐘內(nèi)完成比色。將酶標板從水浴箱中取出后，擦去孔底的水滴。如果有水滴或紙屑殘留在孔底，酶標閱讀器的讀數(shù)就會出現(xiàn)錯誤，往往被誤判為花板。

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