五種酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒檢測方法優(yōu)缺點(diǎn)對比解釋
日期：2021-12-06 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽：1215 次
中海生物技術(shù)為大家解釋五種ELISA試劑zhzbio.com盒酶聯(lián)免疫試劑盒檢測方法優(yōu)缺點(diǎn)對比參照：
| 序號 | ELISA試劑盒檢測方法 | 優(yōu)點(diǎn) | 缺點(diǎn) | 解釋 |
| (一) | 直接法(direct Elisa) | 操作程序短，所以不需要使用二抗，避免了交互反應(yīng)。 | 實(shí)驗(yàn)中所有的一級抗體都要用酶標(biāo)記，但并不是每種抗體都適合標(biāo)記，成本相對較高。 | 抗原總量可通過直接將抗原固定在固體載體上并加入酶標(biāo)一抗來測定。這種一級抗體的特異性非常重要。 |
| (二) | 間接法(indirect Elisa) | 二抗可以加強(qiáng)信號，不同的測定分析有很多選擇。沒有酶標(biāo)記的一級抗體可以保持其免疫反應(yīng)性。 | 互動反應(yīng)產(chǎn)生概率高。 | 這類方法與直接法相似，但不同的是一級抗體沒有用酶標(biāo)記，用酶標(biāo)記的二級抗體鑒定一級抗體來確定抗原的量。 |
| (三) | 雙抗體夾心法(sandwich Elisa) | 靈敏度和特異性高，抗原不用提前純化。 | 抗原務(wù)必有兩個以上的抗體結(jié)合位點(diǎn)。 | 進(jìn)行檢測到的抗原包被在兩種抗體之間，在其中一種抗體將抗原穩(wěn)固在固體載體上，即捕獲抗體。另一種是進(jìn)行檢測抗體，可以用酶標(biāo)記后直接測定抗原量?；蚴菦]有標(biāo)記。隨后用酶標(biāo)二抗測定抗原量。務(wù)必仔細(xì)選擇這兩種抗體，以防止相互間反應(yīng)或競爭相同的抗原結(jié)合位點(diǎn)。 |
| (四) | 競爭法(competitive Elisa) | 適用于不純樣品，數(shù)據(jù)重現(xiàn)性好。 | 整體敏感性和特異性差。 | 樣品中的無抗原抗原與純化并穩(wěn)固在固體載體上的抗原固定化抗原競爭相同的抗體。當(dāng)樣品中游離抗原較多時，可以結(jié)合較多的抗體，而固定化抗原只能夠結(jié)合較少的抗體，相反也是。清洗步驟后，洗去游離抗原和抗體的復(fù)合物，只留下穩(wěn)固抗原和抗體的復(fù)合物，與對照組僅穩(wěn)固抗原的結(jié)果做好比較，依據(jù)色差可以計(jì)算出樣品中的抗原含量。 |
| (五) | 基于細(xì)胞法(cell-based Elisa) | 不用裂解細(xì)胞，于是靶蛋白損失較少，可以測量完整細(xì)胞/貼壁細(xì)胞/非貼壁細(xì)胞。 | 抗原量無法確定。 | 是一種新的定性蛋白質(zhì)檢測技術(shù)，在其中細(xì)胞直接在微孔板中培養(yǎng)。進(jìn)行檢測時，不用提取蛋白質(zhì)或裂解細(xì)胞，直接測量刺激或抑制后微孔板中蛋白質(zhì)的變化。 |
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