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    實(shí)驗(yàn)室支原體污染檢查驗(yàn)證六種鑒別辦法簡(jiǎn)述

    日期:2021-08-20 | 中海生物技術(shù)文庫(kù) | 瀏覽:1197 次

    實(shí)驗(yàn)室支原體污染檢查驗(yàn)證六種鑒別辦法簡(jiǎn)述

    第一種:分離培養(yǎng)法

    支原體的致病性檢測(cè)為主要通過(guò)從受污染的細(xì)胞組織中分離培養(yǎng)支原體來(lái)確定。分離培養(yǎng)法是支原體污染檢測(cè)最可靠最準(zhǔn)確的方法。然而支原體對(duì)環(huán)境的影響非常敏感,極易被滅活,分離培養(yǎng)操作相對(duì)麻煩并且檢測(cè)周期長(zhǎng)。通常只能對(duì)支原體污染檢查進(jìn)行定性觀察。分離和培養(yǎng)方法常用于輔助支原體常規(guī)檢測(cè)中的其他檢測(cè)方法。

    第二種:DNA熒光染色法

    DNA熒光染色法相比分離培養(yǎng)法減少了檢查驗(yàn)證時(shí)長(zhǎng),常用于細(xì)胞培養(yǎng)中污染支原體的檢測(cè)。DNA熒光染色法是基于熒光染料可以與支原體DNA中的AT堿基富集區(qū)結(jié)合的原理。中海檢查被支原體污染的細(xì)胞染色后,在細(xì)胞核外和細(xì)胞周圍可以看到許多大小均勻的組織。

    第三種:ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

    ELISA一般用于檢測(cè)支原體污染檢驗(yàn),具有良好的特異性和靈敏度高,可統(tǒng)一完成大量樣品的檢測(cè),擁有快速定量定性簡(jiǎn)單檢測(cè)等諸多特點(diǎn)。

    第四種:PCR技術(shù)

    PCR有著快速靈敏特異簡(jiǎn)便的基因診斷技術(shù),PCR檢測(cè)技術(shù)已被用于科學(xué)研究和疾病診斷等支原體污染鑒別,其可統(tǒng)一檢測(cè)大批量樣本,其有周期短/靈敏度高/特異性好/操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)。中海生物依據(jù)支原體基因組中的保守序列設(shè)計(jì)特異性引物,對(duì)待測(cè)樣品的核酸進(jìn)行擴(kuò)增,通過(guò)分析擴(kuò)增產(chǎn)物的大小進(jìn)行診斷。

    第五種:電子顯微鏡

    通常細(xì)胞培養(yǎng)需兩至三天時(shí)間,在細(xì)胞接近結(jié)合前,將細(xì)胞胰酶消化制成細(xì)胞懸液,然后用電子顯微鏡在觀察前采用固定嵌入和分段等流程。

    第六種:定時(shí)周期性檢查 

    通常情況支原體感染會(huì)使培養(yǎng)的細(xì)胞逐漸滅亡,所以對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行定期支原體檢測(cè)非常重要。支原體污染檢查驗(yàn)證重點(diǎn)是對(duì)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行常規(guī)支原體污染檢測(cè)的規(guī)范化,做到每30~90天做一次支原體檢查驗(yàn)證。


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