斜面/液體/半固體培養(yǎng)基移種方法

日期：2022-07-12　|　中海生物技術(shù)文庫(kù)　|　瀏覽：1748 次

本文歸納斜面培養(yǎng)基移種方法,液體培養(yǎng)基移種方法,半固體培養(yǎng)基移種方法。

A、斜面培養(yǎng)基移種技術(shù)

㈠材料

瓊脂斜面培養(yǎng)基；經(jīng)分離培養(yǎng)的平板培養(yǎng)物。

㈡方法

①在瓊脂斜面培養(yǎng)基試管上部注明移植菌名稱或編號(hào)/接種日期/接種者組別及編號(hào)。

②左手握住裝有細(xì)菌的平板底部，右手握住接種環(huán)。接種環(huán)在火焰上滅菌冷卻后，蘸取平板線上發(fā)育良好的隔離菌落。將平板放回原位，馬上用這只手拿起斜面培養(yǎng)基斜握。用右手小指和手掌握住衛(wèi)生棉條，輕輕旋轉(zhuǎn)，然后拔出衛(wèi)生棉條，用火焰對(duì)噴嘴進(jìn)行消毒。

㈢將接種環(huán)伸入斜面培養(yǎng)基管底部的固化水中，沿斜面培養(yǎng)基表面自下而上畫一條直線，再自下而上畫一條連續(xù)的折線；不要畫直線，就畫曲折線。取出接種環(huán)，用火焰消毒噴嘴，塞上棉塞，放在試管架上，火焰消毒后放下。

如果移植到斜面培養(yǎng)基上的細(xì)菌在斜面培養(yǎng)基上或液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，中海生物技術(shù)人員用左手斜握菌種管和斜面培養(yǎng)基管，同時(shí)用右手無(wú)名指和小指掌拉起并夾住兩個(gè)棉條。對(duì)噴嘴接種環(huán)進(jìn)行火焰滅菌，從菌種管中取出的細(xì)菌立即移植到斜面上，塞好棉塞，火焰滅菌后放下接種環(huán)。然后，斜面培養(yǎng)基在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)二十四小時(shí)。結(jié)果斜面上形成菌苔。

B、液體培養(yǎng)基移種技術(shù)

用于富集純菌，觀察液體環(huán)境中細(xì)菌的生長(zhǎng)特征:混濁生長(zhǎng)、表面生長(zhǎng)或沉淀生長(zhǎng)。

㈠材料

肉湯培養(yǎng)基；斜面培養(yǎng)物(大腸埃希菌、化膿性鏈球菌、枯草芽胞桿菌)

㈡方法

①取接種環(huán)，在火焰上灼燒滅菌，冷卻。

②雙管移植法左手持細(xì)菌斜面培養(yǎng)和肉湯培養(yǎng)基兩個(gè)試管，右手持接種環(huán)，按無(wú)菌操作辦法取少量細(xì)菌。在靠近液面的傾斜管壁上輕輕涂抹、研磨接種環(huán)，試管直立，使管壁上附著的細(xì)菌浸入液體中。接種后，放入37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

㈢結(jié)果

①混濁生長(zhǎng)大腸桿菌溶液呈均勻混濁，管底有少量沉淀。

②化膿性鏈球菌菌液管底有沉淀，菌液無(wú)明顯混濁。

③菌膜生長(zhǎng):枯草芽孢桿菌液體表面形成一層膜。

C、半固體培養(yǎng)基移種技術(shù)

用于保存細(xì)菌和間接檢查細(xì)菌是否有能力。

㈠材料

半固體培養(yǎng)基；細(xì)菌斜面培養(yǎng)物。

㈡方法

①接種針經(jīng)火焰滅菌冷卻后，斜面培養(yǎng)表面有細(xì)菌染色。

②無(wú)菌法穿刺接種，將接種針插入半固體培養(yǎng)基中央，在距管底0.5cm處停止，然后按原路線退出。穿刺拔出時(shí)注意防止接種針在穿刺線外擺動(dòng)。

③用火焰消毒試管口，并用棉塞塞住。接種用針焰滅菌。培養(yǎng)物在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。