無血清支原體培養(yǎng)基使用說明書-中海生物
日期：2023-12-07 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽：757 次
【產品名稱】
中文名稱：無血清支原體培養(yǎng)基
英文名稱：Sera Free Mycoplasma Medium
漢語拼音：Wuxueqing Zhiyuanti Peiyangji
【性 狀】 液體培養(yǎng)基為澄清，無雜質，呈玫瑰紅色液體；固體培養(yǎng)基為淡黃色固體，
加熱融化后無絮狀物或沉淀；固體培養(yǎng)基輔助液恢復至室溫后為橙色液體。
【作用與用途】 用于血清中支原體的檢驗。
【用法與判定】
1. 液體培養(yǎng)基 先放在室溫半小時，然后置于常溫水中輕輕搖動融化，待全部融化后
分裝后使用。分裝量為：小瓶 20ml/瓶，小管 1.8ml/支。
2. 固體培養(yǎng)基 先將固體培養(yǎng)基和輔助液放在室溫半小時。將固體培養(yǎng)基塑料蓋擰松
一點，微波爐或水浴融化。微波爐融化時使用中火，每次 1 分鐘，待全部融化后使用。輔助
液置于常溫水中輕輕搖動融化，待全部融化后使用。
當固體培養(yǎng)基溫度降到 50℃左右時，,輔助液 37℃預熱后緩慢貼壁加入，混合均勻后按
平皿規(guī)格加入適量培養(yǎng)基（例如直徑 60mm 的平皿加入固體培養(yǎng)基 9ml）制成固體平板。
3. 檢驗 取 2ml 樣品加入到小瓶中，0.2ml 樣品加入到小管中，從小瓶中取液體，分別
移植到 2 支小管液體培養(yǎng)基（0.2ml/支）、2 付固體培養(yǎng)基（0.1~0.2ml/付），將小瓶與小管放
37℃培養(yǎng)，固體培養(yǎng)基放置 37℃、5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。接種后第 5 日、第 10 日、第 15
日從小瓶中取培養(yǎng)物移植 2 支小管液體培養(yǎng)基（0.2ml/支）和 2 付固體平板（0.1~0.2ml/付）。
每日觀察培養(yǎng)物顏色有無變黃或變紫紅的現(xiàn)象，若無變化，在最后 1 次移植培養(yǎng) 14 日后停
止觀察。在觀察期內，如小瓶或任何 1 支小管培養(yǎng)物顏色出現(xiàn)明顯變化（pH 變化達±0.5）
時，應立即移植于 2 支小管液體培養(yǎng)基和 2 付固體平板進行培養(yǎng)，觀察液體培養(yǎng)基是否出現(xiàn)
恒定的 pH 變化以及固體培養(yǎng)基有無支原體菌落生長。
每次檢驗時，均應同時設立陰、陽性對照。陽性對照為接種 1~10CFU/0.2ml 質控菌液
（豬鼻支原體 BTS-7 株）的小管液體培養(yǎng)基，和接種 1~50CFU/0.2ml 質控菌液的固體平板
培養(yǎng)基；陰性對照為接種滅菌生理鹽水的小管液體培養(yǎng)基和固體平板培養(yǎng)基，同上法培養(yǎng)和
觀察。
4. 結果判定
4.1 檢測結果有效性 當陽性對照液體培養(yǎng)基出現(xiàn)顏色變黃，固體平板上出現(xiàn)支原體菌
落；陰性對照液體培養(yǎng)基不變色，固體平板上無支原體菌落時，檢驗有效，并作如下判定。
4.2 判定 若接種樣品的小瓶或小管培養(yǎng)基出現(xiàn)顏色變黃，且固體平板上可見支原體菌
落，則判該樣品有支原體污染。
【注意事項】
1. 培養(yǎng)基自低溫環(huán)境取出，恢復到室溫后使用。液體培養(yǎng)基和輔助液常溫融化；固體
培養(yǎng)基可微波爐或水浴加熱融化。
2. 制備固體平板時，固體培養(yǎng)基冷卻至 50℃左右，,輔助液 37℃預熱后緩慢貼壁加入，輕搖混勻，避免出現(xiàn)氣泡。
3. 進行培養(yǎng)基靈敏度檢驗時的器皿，必須達到細胞培養(yǎng)的要求。
4. 如液體培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁或顏色變化，固體培養(yǎng)基平板表面干裂，應停止使用。
【規(guī) 格】 無血清支原體液體培養(yǎng)基 90ml/瓶；無血清支原體固體培養(yǎng)基 60ml/瓶；無血
清支原體固體培養(yǎng)基輔助液 13ml/瓶。
【貯藏與有效期】 無血清支原體液體培養(yǎng)基-20℃以下保存，有效期為 12 個月；無血清支
原體固體培養(yǎng)基 2~8℃保存，有效期為 12 個月；無血清支原體固體培養(yǎng)基輔助液-20℃以下
保存，有效期為 12 個月。
僅供獸醫(yī)診斷使用
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