配制培養(yǎng)基時的注意事項以及常見問題分析
日期:2023-10-25 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:820 次
培養(yǎng)基在滅菌前,需進行加熱溶解(含瓊脂的培養(yǎng)基需煮沸4-6次至瓊脂完全溶解),再進行分裝滅菌(應不超過1000mL);
含瓊脂培養(yǎng)基,若滅菌前未進行加熱溶解,滅菌后需充分搖勻使用;
所有培養(yǎng)基不宜滅菌過度和長時間保溫,特別是含糖量高的培養(yǎng)基,如沙氏葡萄糖瓊脂,滅菌過度或保溫時間過長易使葡萄糖發(fā)生焦化,滅菌后的培養(yǎng)基顏色會變深,pH會下降,此外還會使蛋白胨中的維生素分解,降低培養(yǎng)基的營養(yǎng);
需另加添加劑的培養(yǎng)基通常在培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時加入,已加入添加劑的瓊脂類培養(yǎng)基不可熔化再次使用;
配制好的培養(yǎng)基需及時滅菌,不可久置;
培養(yǎng)基不可重復滅菌;
瓊脂培養(yǎng)基不可反復熔化使用;待用的瓊脂培養(yǎng)基可置47-50℃水浴保溫或50-60℃烘箱保溫,一般不可超過4小時;
使用蒸餾水或純化水配制。飲用水或自來水中由于含礦物鹽離子,配制培養(yǎng)基會產(chǎn)生渾濁現(xiàn)象;
容器不易過滿,容量至少應比培養(yǎng)基體積大20%。
(1)稱量錯誤
(2)瓊脂分布不均勻
(3)培養(yǎng)基pH不正確
(4)加熱過度
(5)瓊脂量不足
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