培養(yǎng)基配制方法與基本流程步驟
日期:2021-09-15 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽:1560 次
一:培養(yǎng)基配制調(diào)配方法的選取采用
同一類調(diào)配培養(yǎng)基配制方法不一樣,其在培養(yǎng)中常會有某些差別。所以除用到的是標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定方式,應(yīng)嚴(yán)格要求按其規(guī)范做好制備外.中海通常均應(yīng)盡可能搜集相關(guān)數(shù)據(jù)資料.對其進(jìn)行相對驗證.再按照自身的應(yīng)用目標(biāo)對其進(jìn)行選取采用,記載其來源于。
二:培養(yǎng)基的制作配備記載
中海生物每一次制備培養(yǎng)基的配制均具有記載,涉及培養(yǎng)推各稱,調(diào)配方法以及來源于.和各類有效成分的代號(牌號等因廠家而異)。從而酸堿度值/殺菌消毒的工作溫度和時長周期制各的準(zhǔn)確時間和制備者等,記載應(yīng)另存?zhèn)浯嬉环?,原記載保存文檔歸檔,另存記載隨制好的培養(yǎng)基的配制一并儲放、預(yù)防出現(xiàn)混亂。
三:培養(yǎng)基的配制基本成分的稱量
中海培養(yǎng)基配制的各類基本成分一定要精準(zhǔn)稱量并要小心貯放預(yù)防混亂.盡量一次性完成任務(wù),盡量不要出現(xiàn)異常??蓪⒄{(diào)配方法處于傍側(cè),每稱完一類基本成分即在調(diào)配方法上畫出標(biāo)記,并將所需稱量的制劑一次性取齊取足,處于左側(cè),每種稱量結(jié)束之后后,即移擺到右側(cè)。完完全全稱量結(jié)束之后后.還應(yīng)做好一次性檢查。
四:培養(yǎng)基配制中各有效成分的混和和充分均勻溶解
微生物培養(yǎng)基配制用到化學(xué)試劑均該是比較純的。應(yīng)用的蒸汽鍋不能夠為銅鍋或鐵鍋,預(yù)防有少量銅或鐵滲入培養(yǎng)基配制中,使菌株難于成長。盡量應(yīng)用不銹鋼蒸鍋加溫充分均勻溶解.也可放進(jìn)大量杯或大圓底燒瓶中置高壓高壓蒸汽滅菌或移動蒸汽消毒器中蒸制充分均勻溶解。在鍋中充分均勻溶解時、可首先用溫開水加溫并及時振蕩,預(yù)防焦化結(jié)焦、如察覺到有焦化焦燒的情況、該培養(yǎng)基的配制即不能夠應(yīng)用,應(yīng)二次制備。待多數(shù)固體基本成分充分均勻溶解后,用較小火力使全部基本成分完完全全充分均勻溶解.迄至燒開。若為中 海瓊脂培養(yǎng)基配制,先要用部分水將瓊脂充分均勻溶解,用另部分水充分均勻溶解別的基本成分,隨后將兩溶劑充沛混和。在加溫充分均勻溶解流程中,因揮發(fā)而流失的水分,最終一定要對其進(jìn)行補充。
五:培養(yǎng)塞酸堿度的基本調(diào)節(jié)
中海生物技術(shù)zhzbio.com培養(yǎng)基配制各基本成分完完全全充分均勻溶解后,應(yīng)做好酸堿度的基本調(diào)正,因培養(yǎng)基的配制在加溫殺菌消毒流程中、酸堿度會有一定的轉(zhuǎn)變 ,比方說牛肉浸液約可下降酸堿度0.2.而腸浸液酸堿度卻會出現(xiàn)明顯的上升。所以對這種方法步驟,中海技術(shù)工作人員應(yīng)及時小心探尋實踐經(jīng)驗、以求能熟練掌握培養(yǎng)基的配制的從而酸堿度,確保培養(yǎng)基的配制的品質(zhì)。酸堿度調(diào)整后,還應(yīng)將培養(yǎng)基的配制燒開數(shù)分鐘,有利于中'海培養(yǎng)基的配制積淀的進(jìn)行析出。
六:培養(yǎng)基的配制需進(jìn)行過濾清沉淀物
液體培養(yǎng)基一定要肯定清澈,瓊脂培養(yǎng)基配制也應(yīng)通透無明顯積淀,所以需要運用進(jìn)行過濾或別的清澈方式以做到該項標(biāo)準(zhǔn)。通常液體培養(yǎng)基能用過濾紙過濾法,過濾紙應(yīng)拆折成扇面成漏斗形,以規(guī)避因液壓不均衡而導(dǎo)致過濾紙裂開。
瓊脂培養(yǎng)基要用潔凈的白色薄絨布趁熱過濾。也可以用里面包含薄層吸水性強棉的兩層紗布進(jìn)行過濾。新制肉/肝/血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾掉,再用過濾紙反反復(fù)復(fù)進(jìn)行過濾。如過濾法不可以做到清澈標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定、則須用蛋清清澈法。將要降溫至五十五至六十?dāng)z氏度的培養(yǎng)基倒入大的三角燒瓶內(nèi),裝進(jìn)量不能超出圓底燒瓶容積的二分之二,每一千毫升培養(yǎng)基添加一兩個雞蛋的蛋白.強力振搖三五分種,置高壓蒸汽滅菌器中、一百二十一攝氏度加溫二十分、取下趁熱以絨布進(jìn)行過濾就可以了。若能自主沉淀物者,也可以靜放冰箱冷藏室中二十四小時至四十八小時、吸走其上清液就可以了。
七:培養(yǎng)基的分開包裝
培養(yǎng)基的分開包裝,應(yīng)按使用的目標(biāo)和標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,分開包裝于試管、圓底燒瓶等適度玻璃容器內(nèi)。分開包裝量不能超出玻璃容器裝盛量的三分之二。玻璃容器口要用墊有除潮去濕紙的棉塞堵漏,另外還兩用防水紙包扎(現(xiàn)試管通常情況下大多使用螺旋式蓋者)。分開包裝時盡量能使用半自動或電動的定量分析分開包裝器。分開包裝瓊脂抖面培養(yǎng)基時,分開包裝量要以能產(chǎn)生三分之二底層和三分之一斜面的量為合理。分開包裝玻璃容器應(yīng)該給予先清洗干凈并且經(jīng)過干烤消毒殺菌,以利于培養(yǎng)基的完全消毒滅菌。同批培養(yǎng)基應(yīng)此外分開包裝二十毫升培育鑒于一個小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基一起消毒滅菌,覺得檢測該批培養(yǎng)基最后酸堿值的用處。
八:培養(yǎng)基消毒滅菌
通常情況下培養(yǎng)基可選用一百二十一攝氏度高壓蒸汽消毒滅菌十五分的方式。在各種各樣培養(yǎng)基配制流程步驟中,海如無特別明文規(guī)定,就可以了用此法進(jìn)行培養(yǎng)基消毒滅菌。
某種怕熱物質(zhì),如糖類應(yīng)再行配制百分之二十或提高一些的濃液,以進(jìn)行過濾或間歇性消毒滅菌法消毒殺菌,之后再用無菌操作原則技術(shù)應(yīng)用、定量分析加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦使用較低環(huán)境溫度消毒滅菌。血液、體液和抗生素等則應(yīng)是無菌操作原則技術(shù)應(yīng)用實現(xiàn)和添加于經(jīng)降溫約五十?dāng)z氏度上下的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在消毒滅菌后馬上取下、待冷至五十五至六十?dāng)z氏度時,擺放成適度斜面、待其自然而然凝固。
九:培養(yǎng)基品質(zhì)檢測
同批培養(yǎng)基配制好之后.應(yīng)認(rèn)真仔細(xì)一次:如發(fā)覺開裂、水分浸入、色彩出現(xiàn)異常、棉塞被培養(yǎng)基浸染等、均應(yīng)挑出來棄去。并檢測其最后酸堿值。將所有中海培養(yǎng)基倒入三十六正負(fù)一攝氏度的恒溫箱培育隔夜,如發(fā)覺有菌生長,即棄去。用相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定菌株接種一兩管或瓶培養(yǎng)基,培育二十四至四十八鐘頭,如無菌操作原則生長或生長欠佳。應(yīng)查詢驗證因素并反復(fù)接種一回,若結(jié)論仍同之前,則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去,不可以使用。
十:培養(yǎng)基儲存環(huán)境
中.海培養(yǎng)基應(yīng)存貯于冷陰暗處庇蔭,盡量能擺放在普通冰箱內(nèi)。置放時長不適宜超出一星期,傾注的平板培養(yǎng)基不適宜超出七十二小時。同批各次培養(yǎng)基均務(wù)必附帶該批培養(yǎng)基制備的各項記載副頁或顯著標(biāo)識。
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