抗生素檢定培養(yǎng)基I號(hào)低PH6.5~6.6檢驗(yàn)辦法注意事項(xiàng)與實(shí)驗(yàn)操作步驟
日期:2021-11-19 | 中海生物技術(shù)文庫(kù) | 瀏覽:998 次
㈠檢定培養(yǎng)基I號(hào)檢驗(yàn)辦法和用途
主要是利用抗生素在中 海瓊脂培養(yǎng)基中的擴(kuò)散,抑制帶的直徑與抗生素的濃度或活性相關(guān)。一種通過(guò)比較標(biāo)準(zhǔn)品和測(cè)試樣品在接種的測(cè)試細(xì)菌上產(chǎn)生的抑菌圈大小來(lái)判定測(cè)試樣品效價(jià)的辦法。抗生素檢定培養(yǎng)基Ⅰ號(hào)PH6.5~6.6產(chǎn)品符合中國(guó)獸藥典標(biāo)準(zhǔn),適用于磺芐青霉素/拉沙洛西鈉等抗生素效價(jià)測(cè)定。
㈡抗生素檢定培養(yǎng)基I號(hào)注意事項(xiàng)
①灌入的培養(yǎng)基數(shù)量不超過(guò)二十毫升,要不然存放牛津杯后不能蓋緊板蓋。
②細(xì)菌的濃度適合。一旦細(xì)菌的濃度太小,細(xì)菌層的生長(zhǎng)較弱,不能產(chǎn)生抑菌圈。
③菌層培養(yǎng)基表面層一定要光滑細(xì)膩,要不然會(huì)造成牛津杯泄露。
④壓杯板已經(jīng)過(guò)輻照滅菌,可以直接使用;反復(fù)使用后,要用酒精棉擦拭。
⑤將平板遷移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),輕拿輕放避免 劇烈震動(dòng),培養(yǎng)時(shí)不可堆積,避免影響到中海生物產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
㈢抗生素檢定培養(yǎng)基I號(hào)低PH6.5~6.6實(shí)驗(yàn)操作步驟
①稱(chēng)量本產(chǎn)品二十六克,加溫?cái)嚢槿芑谝磺Ш辽儍羲?16℃滅菌二十分鐘左右。
②細(xì)菌懸液的制備??莶菅挎邨U菌/取枯草芽孢桿菌的營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物,接種到含有中'海營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,在三十五至三十七℃培養(yǎng)七天,用革蘭氏染色法涂片鏡檢。應(yīng)當(dāng)超過(guò)八十五個(gè)孢子。孢子用無(wú)菌水洗凈,六十五度加溫半小時(shí)左右備用;
③中海取平板,分別灌入二十毫升加溫融化的培養(yǎng)基,放于水平臺(tái)上固化,作為底層。還有就是,取適量中 海培養(yǎng)基,冷卻至五十度左右,加入適量指定的試驗(yàn)菌懸液,混勻。分別添加盤(pán)中5ml,均勻鋪在底層,作為細(xì)菌層,放于水平臺(tái)上冷卻凝固。
④把牛津杯放于盤(pán)子里。用無(wú)菌鑷子夾住牛津杯正面的凸點(diǎn),放于菌層培養(yǎng)基表面層,蓋緊壓杯板,輕按牛津杯約五秒鐘,使四個(gè)小杯與培養(yǎng)基表面層密切觸碰,避免間隙引起泄露,之后小心地將壓杯板取走。
⑤將標(biāo)準(zhǔn)溶液分別滴入各平板的小管中,遷移至培養(yǎng)箱中三十五至三十七℃培養(yǎng)十四到十六鐘頭,統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)最終結(jié)果。
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