㈠伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基原理:

伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基算是弱選擇性培養(yǎng)基，英文簡稱EMB培養(yǎng)基，通常用于分離鑒別腸道致病菌，尤其是大腸菌群和糞大腸菌群。蛋白胨供應碳源\氮源\維生素\生長因子等營養(yǎng)物質；乳糖是由大腸桿菌發(fā)酵的碳水化合物；磷酸氫二鉀是培養(yǎng)基pH緩沖劑；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；伊紅又稱曙紅或四溴熒光素，為酸性染料，美藍又稱亞甲藍，為堿性染料。它們都被用作培養(yǎng)基中的鑒別指示劑，以抑制革蘭氏陽性菌的生長。

大腸桿菌分解乳糖產酸時，細菌帶正電，因此被染成紅色，再與美藍結合，產生紫黑色菌落，有金屬光澤；產氣腸桿菌呈褐色，幾乎沒有金屬光澤。乳糖分解菌/沙門氏菌和志賀氏菌為乳糖發(fā)酵微生物，產生無色/透明或琥珀色菌落；凝固酶陽性葡萄球菌是具有無色針尖的菌落；白色念珠菌是蜘蛛絲或羽毛菌落。不致病/乳酸不發(fā)酵的革蘭氏陰性菌也會在培養(yǎng)基上生長，需要通過其他的生化試驗來分辨。

㈡伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基EMB配方：

㈢伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基用途方法:

稱取中海伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基干粉37.4g克，添加1.0升蒸餾水或去離子水，攪拌加熱煮沸至完全溶解，在一百二十一度高壓滅菌十五分鐘后備用。

使用中海生物伊紅美藍培養(yǎng)基鑒定水中大腸桿菌，具體操作流程如下所述:

⒈制作伊紅美藍培養(yǎng)基，趁熱注入培養(yǎng)皿，濃縮成平板備用。

⒉取河水或溝水于高溫滅菌錐形瓶中，以1比10稀釋。

⒊在伊紅美藍培養(yǎng)基上接種0.1毫升稀釋液。用劃線平板法分離。

⒋將劃線培養(yǎng)皿倒置，三十七度放置十八至二十四小時。培養(yǎng)基中會出現(xiàn)大腸桿菌菌落，深藍色黑色點有金屬光澤或無光澤。

⒌將菌落接種在斜面培養(yǎng)基上，由營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基制作而成。

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