動(dòng)物寵物elisa試劑盒檢測(cè)標(biāo)本采集注意事項(xiàng)
日期:2022-04-15 | 中海生物技術(shù)文庫(kù) | 瀏覽:833 次
動(dòng)物寵物elisa試劑盒檢測(cè)標(biāo)本采集較為普遍是血漿或血清標(biāo)本,還有某些因檢測(cè)項(xiàng)目特定而普遍使用的尿液/唾液/糞便等標(biāo)本。現(xiàn)階段在血漿血清樣本中測(cè)定的標(biāo)志物通常包含傳染性病原體的抗原和抗體/腫瘤標(biāo)志物/激素/特殊蛋白/細(xì)胞因子和治療藥物。中海生物在采集加工時(shí)要注意下面四點(diǎn):
⑴要重視規(guī)避嚴(yán)重溶血。血紅蛋白含有血紅素基團(tuán),有著類似過(guò)氧化物的活性。因而在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA中,假如血清樣本中血紅蛋白的濃度較高,則在孵育環(huán)節(jié)中容易吸附在固相上,接著與后面進(jìn)入的HRP底物反應(yīng)而顯色。
⑵血清標(biāo)本應(yīng)做好無(wú)菌操作分離,可在2~8℃保存七天,標(biāo)本應(yīng)在-70℃長(zhǎng)時(shí)間保存。假如需帶菌使用,推薦采用冷凍保存方式。
⑶要重視標(biāo)本的采集和血清的分離,盡量減少細(xì)菌污染。這是由于細(xì)菌分泌的某些酶也許會(huì)分解抗體抗原蛋白。某些細(xì)菌的內(nèi)源性酶(大腸桿菌的β-半乳糖苷酶),會(huì)對(duì)相應(yīng)酶標(biāo)記的方法形成非特異性干擾。
⑷冷凍后的血清樣本不宜劇烈搖動(dòng),而應(yīng)混合均勻,并須規(guī)避多次凍融。標(biāo)本多次凍融形成的機(jī)械剪切力會(huì)在標(biāo)本中損壞蛋白質(zhì)等分子,也許造成假陰性結(jié)果。除此之外,凍融標(biāo)本要混合均勻。最終假如標(biāo)本保存環(huán)節(jié)中出現(xiàn)細(xì)菌污染造成的渾濁或絮狀物,離心沉淀后取上清液做好檢測(cè)。
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